幹貨|CAR-T産品質量控制與國(guó)内外法規梳理(lǐ)

T細胞是人(rén)體(tǐ)免疫系統的主力軍，負責攻擊并清除腫瘤細胞，維護人(rén)體(tǐ)健康，但(dàn)腫瘤細胞會通過不斷變異獲得(de)一層僞裝，讓T細胞誤認它是正常細胞，進而逃脫T細胞的“攻擊”而不斷繁殖擴散，如(rú)果能讓T細胞練就(jiù)“火(huǒ)眼金睛”，看(kàn)破腫瘤細胞的僞裝，重新識别并将其清除，則能達到治療的目的，在這一思路(lù)下，CAR-T細胞免疫療法應運而生(shēng)。

嵌合抗原受體(tǐ) T 細胞（CAR-T，Chimeric antigen receptor T cell）是指通過基因修飾技術(shù)将帶有特異性抗原識别結構域及 T 細胞激活信号的遺傳物質轉入 T細胞，也就(jiù)是給T細胞裝上定位導航裝置CAR，使 T 細胞通過直接與腫瘤細胞表面的特異性抗原相(xiàng)結合而激活。T 細胞識别腫瘤細胞後，通過分(fēn)泌穿孔素、顆粒酶素 B 等直接殺傷腫瘤細胞，表達TNF（腫瘤壞死因子）配體(tǐ)誘導腫瘤細胞凋亡，并通過分(fēn)泌細胞因子募集人(rén)體(tǐ)内源性免疫細胞去(qù)殺傷腫瘤細胞，從(cóng)而達到治療腫瘤的目的；同時，還(hái)可(kě)形成免疫記憶 T 細胞從(cóng)而獲得(de)特異性的抗腫瘤長效機(jī)制。

目前該療法在全球研發非常火(huǒ)熱(rè)，根據clinicaltrial.gov 網站(zhàn)數據，全球共有800項CAR-T細胞臨床試驗，中國(guó)446項。

CAR構建體(tǐ)通常通過病毒載體(tǐ)引入T細胞。通常使用的載體(tǐ)是逆轉錄病毒和慢(màn)病毒載體(tǐ)，随機(jī)整合到宿主T細胞基因組中。

下面，我們以慢(màn)病毒載體(tǐ)轉導方法爲例，來(lái)了解CAR-T産品生(shēng)産過程中需要進行的質量控制。

該生(shēng)産過程分(fēn)成三個部分(fēn)：質粒生(shēng)産工(gōng)藝、慢(màn)病毒載體(tǐ)生(shēng)産工(gōng)藝、CAR-T生(shēng)産工(gōng)藝。

簡化過程爲：建立符合要求的大(dà)腸杆菌生(shēng)産用種子庫，複蘇後經發酵、收獲、純化得(de)到需要的質粒，再通過3質粒、4質粒系統轉染293T細胞收獲慢(màn)病毒載體(tǐ)，經純化後轉染供者的T細胞後得(de)到CAR-T。

CAR-T産品生(shēng)産中的每個工(gōng)藝環節都(dōu)影(yǐng)響最終成品制劑的質量。基于不同的工(gōng)藝環節都(dōu)需要開展質量研究、制定質量标準以控制相(xiàng)應的風(fēng)險，保障最終成品的質量，國(guó)内外監管機(jī)構對其生(shēng)産的各個階段均有相(xiàng)應的法規或者指導文件(jiàn)，梳理(lǐ)如(rú)下，感興趣的小夥伴可(kě)去(qù)公衆号後台回複“CAR-T法規”，下載相(xiàng)關文件(jiàn)原件(jiàn)。

中國(guó)相(xiàng)關管理(lǐ)制度與指南(nán)

CAR-T産品的各個生(shēng)産環節均需要進行相(xiàng)應的質量研究并制定質量标準和要求，我們依據相(xiàng)應法規和指導文件(jiàn)進行了如(rú)下梳理(lǐ)。